3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 15

INSTRUCTIONS D'UTILISATION
Suivre attentivement toutes les instructions. Le non-respect des instructions peut entraîner des résultats inexacts.
Décontaminer régulièrement les plans de travail et le matériel du laboratoire (pipettes, outils d'ouverture/fermeture, etc.) avec une solution de 1-5 %
d'eau de Javel (v:v dans de l'eau) ou avec une solution d'élimination de l'ADN.
ENRICHISSEMENT DE L'ÉCHANTILLON
3M recommande d'utiliser le Bouillon modifié Listeria 3M (tableau 2) ou la Base Bouillon demi-Fraser et la Base Bouillon Fraser (tableau 3) pour
l'enrichissement des échantillons alimentaires ou environnementaux.
AVERTISSEMENT : ne pas utiliser de Base Bouillon demi-Fraser ou de Base Bouillon Fraser contenant du citrate de fer ammoniacal (FAC), qu'il soit
déjà présent dans le bouillon ou en tant que supplément ajouté, lors de l'utilisation du Kit de détection moléculaire Listeria 3M.
Aliments
Les tableaux 2 et 3 fournissent des indications pour l'enrichissement des échantillons alimentaires de 25 g dans une dilution de 1:10. Il incombe
à l'utilisateur de valider des protocoles d'échantillonnage ou des proportions de dilution différents pour garantir que cette méthode d'analyse est
conforme à ses critères.
• Préchauffer le milieu d'enrichissement à 37 ± 1 °C.
• Mélanger de manière aseptique le milieu d'enrichissement et l'échantillon. Pour tous les échantillons carnés et à forte teneur en particules, il est
recommandé d'utiliser des sacs avec filtre. Bien homogénéiser pendant 2 minutes, en utilisant un Stomacher, un mélangeur ou en mélangeant à
la main. Incuber à 37 ± 1 °C (voir tableaux 2 et 3).
• Pour les protocoles impliquant l'utilisation d'une Base Bouillon demi-Fraser uniquement : si nécessaire, transférer 0,1 ml du premier
enrichissement dans 10,0 ml de Base Bouillon Fraser (voir tableau 3). Incuber à 37 ± 1 °C pendant 24 à 26 heures.
Échantillons environnementaux
Pour prélever les échantillons, il est possible d'utiliser une éponge hydratée au moyen d'une solution neutralisante afin d'éviter les effets des produits
désinfectants. 3M recommande d'utiliser une éponge en cellulose sans biocide. Pour la solution neutralisante, vous pouvez utiliser par exemple le
bouillon neutralisant (D/E) Dey Engley. Il est recommandé de désinfecter la zone après l'échantillonnage.
AVERTISSEMENT : en cas de recours à une éponge humidifiée à l'aide d'un tampon neutralisant (NB) contenant un complexe d'aryle sulfonate,
diluer l'échantillon environnemental enrichi dans une dilution de 1:2 (1 volume d'échantillon pour 1 volume de bouillon d'enrichissement stérile)
avant l'analyse, afin de réduire les risques associés aux résultats faux négatifs, qui entraînent la libération de produits contaminés.
La zone d'échantillonnage utilisée pour vérifier la présence ou non du pathogène doit faire au moins 100 cm
l'échantillonnage au moyen d'une éponge, couvrir toute la surface dans les deux sens (de gauche à droite puis de haut en bas) ou bien prélever
des échantillons environnementaux selon le protocole d'échantillonnage actuel ou conformément aux normes du Bacteriological Analytical Manual
(Manuel analytique bactériologique – BAM) de la FDA
Food Safety and Inspection Service (Service d'inspection chargé de la sécurité des produits alimentaires – FSIS) du US Department of Agriculture
(ministère de l'Agriculture des États-Unis – USDA)
1. Préchauffer le milieu d'enrichissement à 37 ± 1 °C.
2. Mélanger de manière aseptique le milieu d'enrichissement et l'échantillon. Bien homogénéiser en utilisant un Stomacher, un mélangeur ou en
mélangeant à la main. Pour le protocole impliquant l'utilisation du Bouillon modifié Listeria 3M, bien homogénéiser pendant 2 ± 0,2 minutes. Pour le
protocole impliquant l'utilisation d'une Base Bouillon demi-Fraser, homogénéiser pendant 30 secondes. Incuber à 37 ± 1 °C (voir tableaux 2 et 3).
, au Microbiology Laboratory Guideline (Guide du laboratoire de microbiologie – MLG) du
(1)
ou ISO 18593 .
(2) (6)
4
FR (Français)
(10 x 10 cm). Dans le cas de
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