3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 96

4.5 Gentag trin 4.1 til 4.4 efter behov for antallet af prøver, der skal testes.
4.6 Når alle prøver er overført, overføres 20 µL af NC til et LS-reagensglas. Benyt 3M Molekylær Detektions Værktøj til Cap/Decap (lukning/
åbning) - Lysin-behandling til at lukke LS-reagensglasset igen.
4.7 Dæk LS-reagensglasholderen med låget til holderen, og vend op og ned 3-5 gange for at blande. Suspension skal flyde frit i reagensglasset.
5. Kontrollér, at 3M Molekylær Detektions Varmeblok Indlægget har en temperatur på 100 ± 1 °C. Anbring glasholderen med LS-reagensglas i 3M
Molekylær Detektions Varmeblok Indlægget, og opvarm i 15 ± 1 minutter
behandlingstrin, kan udgøre en væsentlig miljørisiko og bør IKKE anvendes på 3M Molekylær Detektions Instrumentet.
6. Fjern glasholderen med LS-reagensglas fra varmeblokken, og lad den afkøle i 3M Molekylær Detektions Køleblok Indlægget i 10 ± 1 minutter
Fjern glasholderens låg under inkubation på 3M Molekylær Detektions Køleblok Indlægget.
7. Fjern glasholderen med LS-reagensglas fra 3M Molekylær Detektions Køleblok Indlægget/3M Molekylær Detektions Køleblok Bakkesystemet. Sæt
låget på glasholderen med LS-reagensglas på igen, og vend kraftigt 3-5 gange for at blande. Suspension skal flyde frit i reagensglasset.
8. Bank forsigtigt glasholderen med lysin-reagensglas på arbejdsbordet 3-5 gange.
9. Placér glasholderen på laboratoriebordet. Lad det stå uforstyrret i 5-10 minutter for at lade resinen bundfælde. Undlad at blande eller forstyrre
harpiksen på bunden af reagensglasset.
99-101ºC
99-101 °C
(a) I stedet for at afbalancere LS-reagensglassene til stuetemperatur kan man inkubere LS-reagensglassene i en 37 ± 1 °C inkubator i 1 time
eller ved stuetemperatur indtil næste dag (16-18 timer).
(b) Et alternativ til brug af tør varme for lysin-behandlingstrinet er at benytte et vandbad på 100 ± 1 °C. Kontrollér, at der bruges tilstrækkeligt
vand til dækning af væskeniveau i LS-reagensglassene. Anbring glasholderen med LS-reagensglassene i vandbadet ved temp. 100 ± 1 °C, og
opvarm i 15 ± 1 minutter.
(c) LS-opløsningen kan fryse til, hvis man behandler mindre end 48 LS-reagensglas ad gangen. Frysning af LS-opløsningen vil ikke påvirke din
test. Hvis der observeres frysning, lades LS-reagensglassene optø i 5 minutter inden blanding.
AMPLIFIKATION
1. Der skal bruges ét reagensglas til hver prøve og NC.
1.1 Reagensglasstrimler kan tilskæres, så de passer til antallet af reagensglas. Vælg antallet af individuelle reagensglas eller
8-reagensglasstrimler efter behov.
1.2 Anbring reagensglassene i en tom glasholder.
1.3 Undgå at forstyrre reagenskuglerne på bunden af reagensglassene.
2. Vælg 1 Reagens Kontrol (RC)-reagensglas, og anbring det i holderen.
3. For at undgå krydskontaminering åbnes én reagensglasstrimmel ad gangen, og der bruges en ny pipettespids til hvert overførselstrin.
4. Overfør lysat til reagensglas og RC-reagensglas som beskrevet nedenfor:
Overfør hver lysatprøve til individuelle reagensglas først efterfulgt af NC'et. Hydrér RC-reagensglasset til sidst.
ADVARSEL: Udvis forsigtighed, når du pipetterer LS, eftersom overførsel af resinen kan forstyrre amplifikationen.
4.1 Anvend 3M™ Molekylær Detektions Værktøj til Cap/Decap (lukning/åbning) - Reagens til at åbne reagensglassene –ét reagensglasstrimmel
ad gangen. Bortskaf hætten.
4.2 Overfør 20 µL af prøvelysat fra den øvre del af væsken i LS-reagensglas til respektive reagensglas. Dosér med en hældning for at undgå at
forstyrre kuglerne. Bland forsigtigt ved at pipettere op og ned 5 gange.
4.3 Gentag trin 4.2, indtil hver individuel prøve er blevet tilføjet til respektive reagensglas i strimlen.
4.4 Tildæk reagensglassene med de medfølgende ekstrahætter, og benyt den afrundede side af 3M Molekylær Detektions Værktøj til Cap/Decap
(lukning/åbning) -Reagens for at påføre tryk i en frem- og tilbagegående bevægelse, der sikrer, at hætten er omhyggeligt fastspændt.
4.5 Gentag trin 4.1 til 4.4 efter behov for antallet af prøver, der skal testes.
4.6 Når alle prøvelysater er overført, gentages 4.1 til 4.4 til overførsel af 20 µL af NC lysat til et reagensglas
4.7 Overfør 20 µL af NC lysat til et RC-reagensglas. Dosér med en hældning for at undgå at forstyrre kuglerne. Bland forsigtigt ved at pipettere
op og ned 5 gange.
0-20ºC 20-25ºC
0-20 °C 20-25 °C
8
(b) . Prøver, som ikke er blevet korrekt behandlet under analysens lysin-
3X
20-25ºC
20-25 °C
3X
DA (Dansk)
20-25 °C 20-25ºC
(c) .