3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 31

4.6 Lorsque tous les lysats d'échantillons ont été transférés, reprendre les étapes 4.1 à 4.4 afin de transférer 20 µl de lysat de TN dans un tube de
réactifs.
4.7 Transférer 20 µl du lysat du TN dans un tube de TR. Verser en tenant le tube incliné afin de ne pas remuer les granules. Mélanger en
pipetant délicatement de haut en bas 5 fois.
5. Charger les tubes refermés dans un Plateau de chargeur rapide pour détection moléculaire 3M propre et décontaminé. Fermer et verrouiller le
couvercle du Plateau de chargeur rapide pour détection moléculaire 3M.
6. Passer en revue et confirmer l'essai configuré dans le Logiciel de détection moléculaire 3M.
7. Cliquer sur le bouton « Démarrer » du logiciel et sélectionner l'appareil à utiliser. Le couvercle de l'appareil sélectionné s'ouvre automatiquement.
8. Mettre le Plateau de chargeur rapide pour détection moléculaire 3M dans l'Appareil de détection moléculaire 3M, puis fermer le couvercle pour
démarrer l'essai. Les résultats sont fournis en 75 minutes, mais les résultats positifs peuvent être détectés plus rapidement.
9. Une fois l'essai terminé, retirer le Plateau de chargeur rapide pour détection moléculaire 3M de l'Appareil de détection moléculaire 3M et mettre
les tubes au rebut après les avoir fait tremper dans une solution d'agent de blanchiment domestique (concentration de 1 à 5 % – V/V dans l'eau)
pendant 1 heure, à l'extérieur de la zone de préparation de l'essai.
AVIS : pour réduire le risque de faux positifs dus à une contamination croisée, ne jamais ouvrir les tubes de réactifs contenant de l'ADN amplifié.
Ceci comprend les tubes de Témoin des réactifs, de Réactifs et de Témoin matriciel. Toujours éliminer les tubes de réactifs scellés après les avoir
fait tremper dans une solution d'agent de blanchiment domestique (concentration de 1 à 5 % – V/V dans l'eau) pendant 1 heure, à l'extérieur de la
zone de préparation de l'essai.
RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION
Un algorithme interprète la courbe de rendement lumineux résultant de la détection de l'amplification de l'acide nucléique. Les résultats sont
analysés automatiquement par le logiciel et codés par couleur en fonction du résultat. Un résultat positif ou négatif est déterminé par l'analyse d'un
certain nombre de paramètres uniques de la courbe. Les résultats positifs présumés sont fournis en temps réel tandis que les résultats négatifs et
« à vérifier » sont affichés une fois l'essai terminé.
Les échantillons positifs présumés doivent être confirmés selon la procédure standard du laboratoire ou en suivant la confirmation de méthode de
référence appropriée , en commençant par le transfert de bouillons d'enrichissement primaires vers les bouillons d'enrichissement secondaires (si
(1,2,3)
applicable), puis avec le placage et la confirmation des isolats en utilisant les méthodes biochimiques et sérologiques appropriées.
REMARQUE : même un échantillon négatif n'obtiendra pas un résultat nul; en effet, le système et les réactifs d'amplification de l'ensemble Listeria
pour analyse par détection moléculaire 3M disposent d'une unité relative de lumière (URL).
Dans le rare cas d'un rendement lumineux inhabituel, l'algorithme le signale par la mention « à vérifier ». 3M recommande à l'utilisateur de refaire
l'essai pour les échantillons « à vérifier ». Si le résultat continue à être « à vérifier », passer au test de confirmation en utilisant les méthodes usuelles
ou en suivant les méthodes spécifiques répondant aux normes locales.
Pour toute question sur des applications ou des procédures particulières, consultez notre site Web à l'adresse www.3M.com/foodsafety ou
communiquez avec le représentant ou distributeur de produits de 3M de votre région.
BIBLIOGRAPHIE :
1. US Food and Drug Administration Bacteriological Analysis Manual. Chapter 10: Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes in Foods.
Section C-6. April 2011 Version.
2. US Department of Agriculture (USDA), FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 8.08. Isolation and Identification of Listeria monocytogenes from
Red Meat, Poultry and Egg Products, and Environmental Samples. Effective Date: 6 Nov 2012.
3. ISO 11290-1. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs – Horizontal Method for the Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes.
Amendment 1, 2004-10-15.
4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General rules for microbiological examination.
6. ISO 18593. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniques from surfaces using contact plates and
swabs.
20 µL
9
FR (Français)