3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 59

INSTRUCCIONES DE USO
Siga todas las instrucciones atentamente. De lo contrario, los resultados obtenidos podrían llegar a ser incorrectos.
Descontamine periódicamente las mesas de trabajo y el equipo de laboratorio (pipetas, herramientas para encapuchado/desencapuchado, etc.) con
una solución de cloro de uso doméstico del 1% al 5% (v:v en agua) o en una solución para eliminación de ADN.
ENRIQUECIMIENTO DE LA MUESTRA
3M recomienda el uso del Caldo Modificado para recuperación de Listeria 3M (Tabla 2), o la Base de Caldo Demi-Fraser y la Base de Caldo Fraser
(Tabla 3) para el enriquecimiento de muestras ambientales y de alimentos.
ADVERTENCIA: No use la Base de Caldo Demi-Fraser ni la Base de Caldo Fraser que contienen citrato de amonio férrico (FAC), ya sea en el caldo
base o como un suplemento añadido, al utilizar el Análisis de Detección Molecular para Listeria 3M.
Alimentos
En las Tablas 2 y 3, se ofrece una guía para el enriquecimiento de muestras de alimentos de 25 g en una dilución 1:10. Es responsabilidad del usuario
validar protocolos de muestreo o proporciones de dilución alternativos para garantizar que este método de prueba satisface los criterios del usuario.
• Caliente previamente el medio de enriquecimiento a 37 ± 1 °C.
• Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Para todo tipo de carnes y muestras con alto contenido de partículas, se
recomienda utilizar bolsas con filtro. Homogenice totalmente durante 2 minutos (mediante un homogeneizador peristáltico, una mezcladora o
masaje manual). Incube a 37 ± 1 °C (consulte las Tablas 2 y 3).
• Para los protocolos de la Base de Caldo Demi-Fraser solamente: Si es necesario, transfiera 0,1 ml del enriquecimiento primario a 10 ml de
Base de Caldo Fraser (consulte la Tabla 3). Incube a 37 ± 1 °C durante 24 a 26 horas.
Muestras ambientales
Puede usarse como dispositivo para recolección de muestras una esponja hidratada con una solución neutralizante para inactivar los efectos de los
desinfectantes. 3M recomienda usar una esponja de celulosa libre de biocida. La solución neutralizante puede ser Caldo Neutralizante Dey-Engley (D/E).
Se recomienda desinfectar el área después del muestreo.
ADVERTENCIA: Si decidiera usar Solución Amortiguadora Neutralizante (NB) que contenga el complejo aril sulfonato como solución hidratante
para la esponja, deberá preparar una dilución 1:2 (1 parte de muestra en 1 parte de caldo de enriquecimiento estéril) de la muestra ambiental
enriquecida antes de realizar la prueba para reducir los riesgos asociados con un resultado falso negativo que provoque la diseminación de
producto contaminado.
Se recomienda que el tamaño del área de muestreo para verificar la presencia o ausencia de patógenos en la superficie sea de no menos de
100 cm (10 cm x 10 cm o 4" x 4"). Al hacer el muestreo con una esponja, cubra toda el área moviéndose en dos direcciones (de izquierda a derecha
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y luego desde arriba hacia abajo) o recolecte muestras ambientales según su protocolo de muestreo actual o de acuerdo con los lineamientos del
Manual de Bacteriología Analítica (BAM) de la FDA
Inspección de los Alimentos (FSIS) del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (USDA)
1. Caliente previamente el medio de enriquecimiento a 37 ± 1 °C.
2. Combine el medio de enriquecimiento y la muestra de forma aséptica. Homogenice totalmente mediante un homogeneizador peristáltico, una
mezcladora o masaje manual. Para el protocolo del Caldo Modificado para recuperacion de Listeria, homogenice durante 2 ± 0,2 minutos. Para el
protocolo de la Base de Caldo Demi-Fraser, homogenice durante 30 segundos. Incube a 37 ± 1 °C (consulte las Tablas 2 y 3).
(1) , de la guía de Laboratorio de Microbiología (MLG) de la agencia de Servicio de Seguridad e
4
(Español)
ES
o de la norma ISO 18593 .
(2) (6)