3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 53

4.6 Una volta trasferiti tutti i lisati campione, ripetere dal punto 4.1 al punto 4.4 per trasferire 20 µl di lisato NC in un tubo reagente.
4.7 Trasferire 20 µl di lisato NC in un tubo RC. Erogare con un'inclinazione per evitare il movimento delle pastiglie. Miscelare pipettando
delicatamente su e giù per 5 volte.
5. Caricare i tubi provvisti di tappo su un Vassoio per caricamento rapido per il sistema di rilevamento molecolare 3M pulito e decontaminato.
Chiudere saldamente il coperchio del Vassoio per caricamento rapido per il sistema di rilevamento molecolare 3M.
6. Controllare e confermare l'esecuzione configurata sul Software per l'analisi molecolare 3M.
7. Fare clic sul pulsante Start nel software e selezionare lo strumento da utilizzare. Il coperchio dello strumento selezionato si apre automaticamente.
8. Posizionare il Vassoio per caricamento rapido per il sistema di rilevamento molecolare 3M nello Strumento per l'analisi molecolare 3M e chiudere
il coperchio per avviare l'analisi. I risultati sono forniti entro 75 minuti, sebbene quelli positivi possano essere rilevati prima.
9. Una volta completata l'analisi, rimuovere il Vassoio per caricamento rapido per il sistema di rilevamento molecolare 3M dallo Strumento per
l'analisi molecolare 3M e smaltire i tubi immergendoli in una soluzione di candeggina per uso domestico 1-5% (diluita con acqua v:v) per 1 ora
e lontano dall'area di preparazione dell'analisi.
AVVISO: per ridurre il rischio di falsi positivi dovuti alla contaminazione crociata, non aprire mai i tubi di reagente contenenti DNA amplificato.
Ciò include tubi di Controllo reagente, Reagente e Controllo matrice. Smaltire sempre i tubi di reagente sigillati immergendoli in una soluzione di
candeggina per uso domestico 1-5% (diluita con acqua v:v) per 1 ora e lontano dall'area di preparazione dell'analisi.
RISULTATI E INTERPRETAZIONE
Un algoritmo interpreta la curva di emissione luminosa risultante dal rilevamento dell'amplificazione degli acidi nucleici. I risultati sono analizzati
automaticamente dal software e codificati mediante un colore in base all'esito. Un risultato positivo o negativo è determinato dall'analisi di un numero
di parametri unici della curva. I presunti risultati positivi sono riportati in tempo reale mentre i risultati Negativi e Da esaminare sono visualizzati al
completamento dell'esecuzione.
I presunti risultati positivi vanno confermati in base alle procedure operative standard del laboratorio o seguendo un adeguato metodo di
riferimento per la conferma , iniziando dal trasferimento dall'arricchimento primario ai brodi di arricchimento secondari (se pertinente), seguito
(1,2,3)
dall'applicazione di un disco e dalla conferma degli isolati utilizzando metodi biochimici e sierologici adeguati.
NOTA: anche un campione negativo non fornirà una lettura zero poiché il sistema e i reagenti di amplificazione dell'Analisi molecolare 3M della
Listeria hanno un'unità di luce relativa (RLU) di "background".
Nel raro caso di emissione luminosa inusuale, l'algoritmo la classifica come "Da esaminare". 3M consiglia all'utente di ripetere l'analisi per qualsiasi
campione Da esaminare. Se il risultato continua ad essere Da esaminare, procedere con il test di conferma utilizzando il metodo desiderato o
seguendo le specifiche delle normative locali
Per qualsiasi domanda su applicazioni o procedure specifiche, visitare il sito Web all'indirizzo www.3M.com/foodsafety o contattare il distributore o il
rappresentante 3M di zona.
BIBLIOGRAFIA:
1. US Food and Drug Administration Bacteriological Analysis Manual. Chapter 10: Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes in Foods.
Section C-6. April 2011 Version.
2. US Department of Agriculture (USDA) FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 8.08. Isolation and Identification of Listeria monocytogenes from
Red Meat, Poultry and Egg Products, and Environmental Samples. Effective Date: 6 Nov 2012.
3. ISO 11290-1. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs – Horizontal Method for the Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes.
Amendment 1, 2004-10-15.
4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General rules for microbiological examination.
6. ISO 18593. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniques from surfaces using contact plates and
swabs.
20 µL
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IT (italiano)