3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 74

4.5 Herhaal stappen 4.1 tot 4.4 voor alle monsters die worden getest.
4.6 Zodra alle monsters zijn overgebracht, brengt u 20 µL NC over naar een LO-buisje. Gebruik het 3M Moleculaire Detectie Cap/Decap
gereedschap - Lyse om het LO-buisje opnieuw te sluiten.
4.7 Dek het rek met LO-buisjes af met het rekdeksel en draai het 3-5 keer stevig om om alles te mengen. De suspensie moet vrijelijk in het
buisje stromen.
5. Controleer dat de temperatuur van het 3M Moleculaire Detectie - Verwarmingsblokinzetstuk zich op 100 ± 1 °C bevindt. Plaats het rek met
LO-buisjes in het 3M Moleculaire Detectie - Verwarmingsblokinzetstuk en verwarm 15 ± 1 minuten
niet de correcte warmtebehandeling hebben ondergaan, kunnen als een potentieel biologisch gevaar worden beschouwd en mogen NIET in het
3M Moleculaire Detectieinstrument worden geplaatst.
6. Haal het rek met LO-buisjes van de verwarmingsblok en laat het 10 ± 1 minuten lang afkoelen in het 3M Moleculaire Detectie -
. Verwijder het rekdeksel tijdens de incubatie op het 3M Moleculaire Detectie - Koelblokinzetstuk.
Koelblokinzetstuk
(c)
7. Haal het rek met LO-buisjes van het 3M Moleculaire Detectie - Koelblokinzetstuk/3M Moleculaire Detectie - Ladesysteem voor koelblok. Vervang
het deksel op het rek met LO-buisjes en keer 3-5 maal krachtig om om te mengen. De suspensie moet vrijelijk in het buisje stromen.
8. Tik het rek voor lysebuisjes 3-5 maal krachtig op de laboratoriumwerkbank.
9. Plaats het rek op de laboratoriumtafel. Laat het 5-10 minuten met rust zodat de hars zich kan zetten. Meng of beweeg de hars op de bodem
van de buis niet.
99-101ºC
99-101 °C
(a) Alternatieven om de LO-buisjes op kamertemperatuur te laten komen, zijn het incuberen van de LO-buisjes in een incubator op 37 ± 1 °C
gedurende 1 uur of op kamertemperatuur gedurende de nacht (16-18 uur).
(b) Een alternatief voor het gebruiken van droge lucht voor de lysestap is het gebruik van een waterbad op 100 ± 1 °C. Zorg ervoor dat er
voldoende water wordt gebruikt om het vloeistofniveau in de LO-buisjes te bedekken. Plaats het rek met LO-buisjes in het waterbad op
100 ± 1 °C en verwarm 15 ± 1 minuten.
(c) De LO-oplossing kan bevriezen als u minder dan 48 LO-buisjes verwerkt. Het bevriezen van de lyse-oplossing beïnvloedt uw test niet. Als er
bevriezing wordt waargenomen, laat de LO-buisjes dan 5 minuten ontdooien voordat u mengt.
AMPLIFICATIE
1. Er is een reagensbuisje vereist voor elk monster, evenals de NC.
1.1 De reagensbuisstroken kunnen geknipt worden tot aan het gewenste aantal reagensbuisjes. Selecteer het aantal vereiste individuele
reagensbuisjes of 8-buis stroken.
1.2 Plaats reagensbuisjes in een leeg rek.
1.3 Vermijd dat u de reagens op de bodem van de buisjes beweegt.
2. Selecteer 1 buisje voor Reagenscontrole (RC) en plaats hem in het rek.
3. Om kruisbesmetting te vermijden, opent u één strook met reagensbuisjes per keer en gebruikt u een nieuw pipetuiteinde voor elke
overdrachtstap.
4. Breng lysaat over naar de reagensbuisjes en het RC-buisje zoals hieronder wordt beschreven:
Breng elk lysaatmonster eerst over naar de individuele reagensbuisjes, gevolgd door de NC. Hydrateer de RC-buis het laatst.
WAARSCHUWING: wees voorzichtig bij het pipetteren van LO aangezien de overdracht van hars de amplificatie kan beïnvloeden.
4.1 Gebruik het 3M™ Moleculaire Detectie Cap/Decap gereedschap - Lyse om een LO-buisstrook open te doen - één buisstrook per keer. Gooi de
dop weg.
4.2 Breng 20 µL van het lysaatmonster uit de bovenste laag van de vloeistof in het LO-buisje over naar het bijhorende reagensbuisje. Laat het
mengsel in een hoek uitlopen om de pellets niet te veel te bewegen. Meng door voorzichtig 5 keer naar boven en naar onder te pipetteren.
4.3 Herhaal stap 4.2 totdat elk individueel lysaatmonster is toegevoegd aan het bijhorende reagensbuisje in de strook.
4.4 Bedek het reagensbuisje met de bijgeleverde extra dop en gebruik de afgeronde zijde van het 3M Moleculaire Detectie Cap/Decap
gereedschap - Reagens om druk uit te oefenen in een voor- en achterwaartse beweging om ervoor te zorgen dat de dop goed vastzit.
4.5 Herhaal stappen 4.1 tot 4.4 voor alle monsters die worden getest.
4.6 Zodra alle lysaatmonsters zijn overgebracht, herhaalt u stappen 4.1 tot 4.4 om 20 µl NC lysaat over te brengen naar een reagensbuisje.
0-20ºC 20-25ºC
0-20 °C 20-25 °C
8
NL
. Monsters die tijdens de lyseanalysestap
(b)
3X
20-25ºC
20-25 °C
3X
20-25 °C 20-25ºC
(Nederlands)