3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 85

5. Kontrollera att temperaturen för 3M Molekylär Detektion, Insats för Värmeblock är vid 100 ± 1 °C. Placera stället med LS-rör i 3M Molekylär
Detektion, Insats för Värmeblock och värm i 15 ± 1 minuter
betraktas som potentiell biologisk fara och ska INTE föras in i 3M Molekylärt Detektionsinstrument.
6. Ta stället med LS-rör från värmeblocket och låt svalna i 3M Molekylär Detektion, Insats för kylblock i 10 ± 1 minuter
under inkubationen på 3M Molekylär Detektion, Insats för kylblock.
7. Ta bort stället med LS-rör från systemet 3M Molekylär Detektion, Insats för kylblock/ 3M Molekylär Detektion, Kylblockslåda. Sätt tillbaka locket på
stället med LS-rör och vänd kraftfullt upp och ned 3-5 gånger för att blanda. Suspensionen måste flöda fritt inuti röret.
8. Knacka stället med lyseringsrör kraftfullt 3-5 gånger på laboratoriebänken.
9. Placera stället på laboratoriebänken. Låt stå ostört i 5-10 minuter för att hartset ska sedimentera. Hartset i rörets botten får inte blandas eller
röras upp.
99-101ºC
99-101 °C
(a) Alternativ för att få LS-rören att uppnå rumstemperatur är att inkubera LS-rören i en inkubator vid 37 ± 1 °C i 1 timme eller i rumstemperatur
över natten (16-18 timmar).
(b) Ett alternativ till att använda torr värme för lyseringssteget är att använda ett vattenbad vid 100 ± 1 °C. Se till att använda tillräckligt med
vatten för att fylla upp till vätskenivån i LS-rören. Placera stället med LS-rör i vattenbadet vid 100 ± 1 °C och värm i 15 ± 1 minuter.
(c) LS-lösningen kan frysa vid behandling av mindre än 48 LS-rör. Att LS-lösningen fryser påverkar inte ditt test. Om de fryser, låt LS-rören tina
i 5 minuter före blandning.
AMPLIFIERING
1. Ett reagensrör krävs för varje prov och för NC.
1.1 Remsorna med reagensrör kan klippas till önskat antal rör. Välj det antal individuella reagensrör eller remsor med 8 rör som behövs.
1.2 Placera reagensrören i ett tomt ställ.
1.3 Undvik att röra upp reagenspelletarna i rörens botten.
2. Välj 1 rör för reagenskontroll (RC) och placera det i stället.
3. Undvik korskontaminering genom att öppna en remsa reagensrör i taget och använda en ny pipettspets för varje överföringssteg.
4. Överför lysat till reagensrören och RC-röret enligt nedan:
Överför varje provlysat till individuella reagensrör först, följt av NC. Hydratisera RC-röret sist.
VARNING: Var försiktig vid pipettering av LS eftersom överföring av harts kan störa amplifieringen.
4.1 Använd 3M™ Molekylär Detektion, Cap/Decap Redskap - Reagens för att öppna reagensrören, en remsa reagensrör åt gången. Kassera locket.
4.2 Överför 20 µl provlysat från den övre delen av vätskan i LS-röret till motsvarande reagensrör. Dispensera under lutning för att undvika att
pelletarna rörs upp. Blanda genom att försiktigt pipettera upp och ned 5 gånger.
4.3 Upprepa steg 4.2 tills varje individuellt provlysat har lagts till ett motsvarande reagensrör i remsan.
4.4 Täck reagensrören med de medföljande extralocken och använd den rundade sidan på 3M Molekylär Detektion, Cap/Decap Redskap -
Reagens för att anbringa tryck i en fram- och tillbakagående rörelse som ser till att locket blir tätt förslutet.
4.5 Upprepa steg 4.1 till 4.4 efter behov för det antal prover som ska testas.
4.6 När alla provlysat har överförts, upprepa steg 4.1 till 4.4 för att överföra 20 µl NC-lysat till ett reagensrör.
4.7 Överför 20 µl NC-lysat till ett RC-rör. Dispensera under lutning för att undvika att pelletarna rörs upp. Blanda genom att försiktigt pipettera
upp och ned 5 gånger.
. Prover som inte har värmebehandlats korrekt under analysens lyseringssteg bör
(b)
20-25ºC
0-20ºC
0-20 °C 20-25 °C
8
SV
3X
20-25 °C 20-25ºC
3X
20-25ºC
20-25 °C
(Svenska)
. Ta bort ställets lock
(c)