3M Listeria MDAL96 Manual Del Usuario página 20

4.6 Lorsque tous les lysats d'échantillons ont été transférés, répéter les étapes 4.1 à 4.4 afin de transférer 20 µl de lysat de NC dans un tube de
réactif.
4.7 Transférer 20 µl de lysat de NC dans un tube de RC. Incliner la pipette pour ne pas agiter les pastilles. Mélanger en effectuant 5 cycles
d'aspiration/refoulement avec la pipette.
5. Charger les tubes recouverts d'un bouchon dans un Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M propre et
décontaminé. Fermer et verrouiller le couvercle du Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M.
6. Examiner et confirmer l'analyse configurée sur le Logiciel de détection moléculaire 3M.
7. Cliquer sur le bouton « Démarrer » du logiciel et sélectionner l'instrument à utiliser. Le couvercle de l'appareil sélectionné s'ouvre
automatiquement.
8. Placer le Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M dans l'Instrument de détection moléculaire 3M et fermer le
couvercle pour lancer l'essai. Les résultats sont obtenus en 75 minutes ; toutefois, les résultats positifs peuvent être détectés plus tôt.
9. Une fois l'analyse terminée, retirer le Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M de l'Instrument de détection
moléculaire 3M et tremper les tubes dans une solution d'eau de Javel à 1-5 % (v:v dans de l'eau) pendant 1 heure, et ce à l'écart de la zone de
préparation des analyses.
AVIS : pour réduire le risque de résultats faux positifs dus à la contamination croisée, ne jamais ouvrir les tubes de réactif contenant de l'ADN
amplifié. Ceci comprend les tubes de Contrôle de réactif, de Réactif et de Contrôle de matrice. Toujours éliminer les tubes de réactif fermés en les
trempant dans une solution d'eau de Javel à 1-5 % (v:v dans de l'eau) pendant 1 heure, et ce à l'écart de la zone de préparation des analyses.
RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION
Un algorithme interprète la courbe de résultats lumineuse provenant de la détection de l'amplification de l'acide nucléique. Les résultats sont
automatiquement analysés par le logiciel et sont codés par couleur en fonction du résultat. Le logiciel identifie les résultats positifs ou négatifs en
analysant un certain nombre de paramètres uniques en ce qui concerne la courbe. Les résultats présumés positifs sont rapportés en temps réel
tandis que les résultats négatifs ou à vérifier sont affichés à la fin de l'essai.
Les résultats présumés positifs doivent être confirmés selon les procédures standard des laboratoires ou en suivant la confirmation de la méthode de
référence appropriée , en commençant par effectuer un transfert du premier enrichissement dans les bouillons de second enrichissement (le cas
(1,2,3)
échéant), puis un étalement et une confirmation des isolats au moyen des méthodes biochimiques et sérologiques appropriées.
REMARQUE : même un échantillon négatif n'obtiendra pas un résultat nul : en effet, le système et les réactifs d'amplification du Kit de détection
moléculaire Listeria 3M disposent d'une unité relative de lumière (RLU) « de fond ».
Dans le cas peu probable d'un résultat lumineux inhabituel, l'algorithme considérera ce dernier comme « À vérifier ». 3M recommande à l'utilisateur
de recommencer l'essai pour tout échantillon considéré comme « À vérifier ». Si le résultat continue à être « À vérifier », passer au test de
confirmation en utilisant les méthodes usuelles ou suivant les méthodes spécifiques répondant aux normes locales.
Si vous avez des questions concernant des applications ou procédures spécifiques, veuillez consulter notre site Internet à l'adresse
www.3M.com/foodsafety ou contacter votre représentant ou distributeur 3M local.
RÉFÉRENCES :
1. US Food and Drug Administration Bacteriological Analysis Manual. Chapter 10: Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes in Foods.
Section C-6. April 2011 Version.
2. US Department of Agriculture (USDA) FSIS Microbiology Laboratory Guidebook 8.08. Isolation and Identification of Listeria monocytogenes from
Red Meat, Poultry and Egg Products, and Environmental Samples. Effective Date: 6 Nov 2012.
3. ISO 11290-1. Microbiology of Food and Animal Feeding Stuffs – Horizontal Method for the Detection and Enumeration of Listeria monocytogenes.
Amendment 1, 2004-10-15.
4. ISO/IEC 17025. General requirements for the competence of testing and calibration laboratories.
5. ISO 7218. Microbiology of food and animal feeding stuffs – General rules for microbiological examination.
6. ISO 18593. Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal methods for sampling techniques from surfaces using contact plates and
swabs.
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